Glue 活化辣根过氧化物酶 A型
| Glue 活化辣根过氧化物酶 A型 ●产品特点：
本酶标记试剂盒采用活化的辣根过氧化物酶 ，与待记抗原或抗体混合后30分钟即可完成标记，标记方法简便快速，可以进行微量抗原抗体标记；标记完后无需透析即时使用，标记率高，可大于95%；本底远远低于其它方法。
●适用范围：适用于抗原抗体或其它蛋白的辣根过氧化物酶（HRP）标记。
●包装规格：
3mg活化 HRP×10支 480元
●试剂组成：
REAGENT Ⅰ 溶解抗原、抗体的缓冲液
REAGENT Ⅱ 活化辣根过氧化物酶
REAGENT Ⅲ 反应启动剂
REAGENT Ⅳ 终止液
●操作步骤：
1. 称取待标记物：按照抗原约100ug（HRP：X的分子mol比保持在30:1左右），或抗体400 µg，然后加入REAGENTⅠ100 μl，充分溶解，混匀。
2. 把上述抗原抗体溶液全部转入REAGENT Ⅱ活化辣根氧化物酶（注意管壁上的干粉HRP要完全冲洗溶解）。
3. 立即以REAGENT Ⅲ 调pH值（约3ul）。pH值约在8.0～10.5之间，反应时间30~90分钟完成标记。如pH 值为7.5 左右反应时间2 小时，也可以4℃过夜。
4. 加入REAGENT Ⅳ 100 μl，混匀30分钟，终止反应。（如不马上使用，可省略此步骤）
5. 酶标物以1MHCl调PH7.0加50%甘油（或BSA）及防腐剂， 4℃保存备用（也可-20℃ ，但忌反复冻融）。
注：如果抗原（或抗体）为溶液状态，从
步骤2开始操作。
●注意事项：
1. 抗原抗体如果是存在于硫酸铵、甘氨酸或Tris缓冲液中，需以PBS缓冲液充分透析，也可以超滤离心管进行超滤，以除去过多盐类。
2. REAGENT Ⅲ反应启动剂，有刺激气味，如皮肤眼睛不慎接触，请用大量水冲洗。
3.反应最佳PH值，不同蛋白有所不同。随着PH增高，应增加HRP的量。
4.本试剂仅用于科学研究，体外诊断试剂；禁用于其他用途，如食品、化妆品、药品等
5.总反应时间最好大于4小时，可以更好的消除本底。
●贮存： -20℃保存。
●保质期：一年（见瓶签）
包装清单：
FAQ：
Q：HRP：抗原抗体的mol比多少最为合适?
A: 和传统的过碘酸法是一样的，比例因被标记的抗原抗体性质有所不同.如果再提高标记率，可以提高HRP：X的比例。
Q：反应体系一般控制在多少?
A:反应体系越小，蛋白浓度越大标记率越高.
Q：反应PH值多少最为合适?
A: 和传统的过碘酸法是一样的，PH值因被标记的抗原抗体性质有所不同.一般大于7.2可以启动反应。PH值过高，活性基团分解过快，从而导致标记率降低。
Q：反应时间多少最为合适?
A: 和蛋白的性质和反应PH值有关，30分钟，一般PH值8.0左右，120分钟完成标记。4小时可以更好消除本底.
Q：终止液必须加吗?
A: 超过4小时可以不加.
Q：标记完酶标物原液如何保存?
A: 酶标物以1MHCl调PH7.0加50%甘油及防腐剂， 4℃保存备用（也可-20℃ ，但忌反复冻融）。
Q：稀释好的应用液有哪些成分？如何保存?
A:应该含有一定量的与无关检测动物蛋白
反应促进剂、一定PH值缓冲液、指示剂和酶稳定剂.可以采用本公司浓缩应用液.
Q：对抗原抗体的缓冲液有什么要求？
A: 和传统的过碘酸法是一样的，抗原抗体
如果是存在于硫酸铵、甘氨酸或Tris缓冲液中，需以PBS缓冲液充分透析，也可以超滤离心管进行超滤，以除去过多含有氨基的小分子。
Q：什么样的抗原标记率高？
A: 和传统的过碘酸法是一样的，碱性蛋白因含的氨基较多，标记率较高。
Q：本试剂盒可以标记DNA、农药、兽药等等小分子物质吗？
A: 本试剂盒针对氨基进行标记，故只对含
有氨基的小分子，如瘦肉精、DNA、多肽等等。标记时，如要提高HRP 的利用率，可以加入过量的小分子，然后透析除去游离的小分子；如果要即时使用，参考蛋白抗原的标记，减少小分子的用量，从而减少游离的小分子。
Q：REAGENT Ⅲ反应启动剂，易挥发，有替代物吗？
A: 可以采用5M的NaOH。
Q：如何采购贵公司的产品？
A:各地区暂时没有代理，可以直接向公司订购，一般款到发货。
订购电话： 0531-82861981 传 真： 0531-82861981 技术咨询： 13210591288 Email： longduo@163.com tthbio@163.com
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Glue 活化辣根过氧化物酶 A型